①取新鲜edta·k2抗凝静脉血0.5ml至一新的去rnase 1.5ml epp管中，加入1mltrnzol，充分振荡混匀。 ②15-30℃放置5min，使核酸蛋白复合物完全分离。 ③4℃ 12000rpm离心10min取上清至一新的去rnase 1.5ml epp管中。

④加入0.2ml氯仿，盖好管盖，剧烈振荡15s，室温放置3min。

⑤4℃ 12000rpm离心15min，样品分为三层：黄色的有机相，中间层和上层的无色水相，rna主要在水相中，把水相（约600μl）转移至新的去rnase 1.5ml epp管中。加入等体积异丙醇，混匀，室温放置30min。

⑥4℃ 12000rpm离心10min，去上清，离心前rna沉淀经常是看不见的，离心后在管侧或管底形成胶状沉淀。

⑦加入1ml edpc水配制的75%乙醇洗涤沉淀。

⑧4℃ 5000rpm离心3min，倒出液体，注意不要倒出沉淀，剩余少量液体短暂离心，然后用枪头吸出，注意不要吸弃沉淀。

⑨室温放置晾干（注意不要晾的过干，rna完全干燥后会很难溶解，大约晾干2-3min左右即可），加入30μl rnase-free ddh2o，反复吹打、混匀，充分溶解rna。

⑩核酸蛋白定量仪检测rna纯度和浓度，a260/a280在1.8-2.0之间，1%琼脂糖凝胶电泳检测rna完整性。